Revisão de Histologia do professor Guilhermo Giubi, sobre os conceitos básicos, corantes e microscopia básica.
1) Pasos en la preparación de una muestra de tejido u órgano y resumen breve:
La preparación de una muestra de tejido u órgano para estudios histológicos incluye varios pasos fundamentales:
Fijación: El tejido se preserva mediante la inmersión en una solución fijadora, como formaldehído, para evitar la descomposición y conservar su estructura.
Deshidratación: El tejido fijado se pasa por una serie de soluciones de alcohol en concentración creciente (del 70% al 100%) para eliminar el agua.
Aclaramiento: Se utiliza un solvente, como el xileno, para eliminar el alcohol y permitir la infiltración de parafina.
Inclusión: El tejido se infiltra con parafina líquida para endurecerlo y facilitar el corte en secciones delgadas.
Corte: Secciones delgadas (de 3 a 5 micras) se cortan del bloque de parafina utilizando un microtomo.
Montaje: Las secciones se montan en portaobjetos de vidrio para su posterior tinción.
Tinción: Las muestras se tiñen para resaltar las estructuras celulares y tisulares bajo el microscopio.
2) ¿Cuál es el grosor del corte en la muestra que logra el microtomo?
El microtomo generalmente corta las muestras de tejido en secciones con un grosor entre 3 y 5 micrómetros (μm), lo suficientemente delgadas como para permitir la transmisión de luz a través del tejido y su visualización bajo un microscopio óptico.
3) Definición de Histoquímica y Citoquímica:
Histoquímica: Es el estudio de la composición química de las células y tejidos utilizando técnicas de tinción y reacciones químicas específicas para identificar y localizar compuestos químicos dentro de una muestra de tejido. Se enfoca en estructuras a nivel tisular.
Citoquímica: Es similar a la histoquímica, pero se centra en la detección y localización de sustancias químicas a nivel celular. Utiliza técnicas de tinción para visualizar la distribución de moléculas específicas dentro de las células.
4) Tabla comparativa entre la Hematoxilina y la Eosina:
Característica | Hematoxilina | Eosina |
Color | Azul o púrpura | Rosa o rojo |
Tipo de Colorante | Básico | Ácido |
Afinidad | Tiñe estructuras ácidas (basófilas) como el núcleo | Tiñe estructuras básicas (acidófilas) como el citoplasma |
Uso Principal | Resaltar el núcleo y estructuras ricas en ácidos nucleicos | Resaltar el citoplasma y componentes extracelulares como las fibras colágenas |
Combinación | Generalmente se usa en combinación con Eosina en la tinción H&E | Utilizada junto con Hematoxilina en la tinción H&E |
5) Nombra 5 tipos de técnicas de tinciones diferentes a la H&E:
Tinción de Gram: Utilizada para clasificar bacterias en Gram positivas y Gram negativas.
Tinción de Giemsa: Comúnmente utilizada para la visualización de células sanguíneas y parásitos como el Plasmodium.
Tinción PAS (Ácido Periódico-Schiff): Tiñe carbohidratos y glicoproteínas en tejidos.
Tinción de Tricrómico de Masson: Diferencia entre fibras de colágeno (verde o azul), citoplasma (rojo) y núcleos (negro).
Tinción de Azul de Toluidina: Utilizada para detectar la metacromasia en tejidos, particularmente en
6) Clasificación de colorantes ácidos y básicos (Tabla 1-2):
Tipo de Colorante | Ejemplos de Colorantes |
Ácidos | Eosina, Fucsina ácida, Azul de anilina, Naranja G |
Básicos | Hematoxilina, Azul de metileno, Verde de malaquita, Safranina |
7) Metacromasia. Concepto:
Metacromasia es un fenómeno donde ciertos tejidos o células, al teñirse con colorantes básicos como el azul de toluidina, muestran un cambio de color distinto al del colorante original. Esto ocurre cuando moléculas como los glicosaminoglicanos se agrupan, lo que altera la absorbancia del colorante, generando un color diferente. Es característico de mastocitos, donde los gránulos de heparina muestran un cambio de color.
8) Resolución del ojo humano en comparación con la de los microscopios (Tabla 1-3):
Instrumento | Resolución |
Ojo humano | Aproximadamente 200 micrómetros (μm) |
Microscopio óptico | Entre 0.2 y 0.25 micrómetros (μm) |
Microscopio electrónico | Hasta 0.2 nanómetros (nm) |
9) ¿Cuál es la fuente de energía del Microscopio Óptico y Electrónico?
Microscopio Óptico: La fuente de energía principal es la luz visible, generalmente proveniente de una lámpara halógena o LED, que ilumina la muestra para su visualización.
Microscopio Electrónico: Utiliza un haz de electrones como fuente de energía, en lugar de luz visible, lo que permite una resolución mucho mayor debido a la longitud de onda más corta de los
10) Dibuja a mano un microscopio Óptico y señala sus partes:
Ocular: La lente en la parte superior por donde se observa la muestra.
Tubo óptico: Conecta el ocular con los objetivos.
Revólver: Sostiene los objetivos y permite cambiarlos.
Objetivos: Lentes de diferentes aumentos (ej. 4x, 10x, 40x, 100x).
Platina: Superficie donde se coloca la muestra.
Pinzas: Sostienen la muestra en su lugar en la platina.
Diafragma: Regula la cantidad de luz que pasa a través de la muestra.
Condensador: Lente que enfoca la luz sobre la muestra.
Fuente de luz: Lámpara que ilumina la muestra desde abajo.
Tornillos de enfoque: Ajustan la nitidez de la imagen (macrométrico y micrométrico).
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